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馬立克氏病病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-10
點(diǎn)擊次數(shù):
762
產(chǎn)品特點(diǎn):
馬立克氏病病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  50T馬立克氏病病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

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產(chǎn)品名稱

馬立克氏病病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

 英文名稱

 Marek's Disease Virus(MDV)PCR

 貨號(hào)

 HE31197-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
非洲防己堿英文名稱 Tubeimoside C分 子 量: 1365.46CAS NO.: 115810-13-4純 度: ≥98%分子式: C64H100O31性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性:提取來源:藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法:貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng):

粉防己堿英文名稱 Teicoplanin分 子 量: 1709.39CAS NO.: 61036-62-2純 度: ≥98%分子式: C78H77Cl2N8O32R性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性:提取來源:藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法:貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng):

風(fēng)信子素英文名稱 Tenacissoside X分 子 量: 1261.4CAS NO.: 875057-87-7純 度: ≥98%分子式: C61H96O27性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 通關(guān)藤藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng):

縫籽嗪甲醚英文名稱 Deoxyarbutin分 子 量: 194.23CAS NO.: 53936-56-4純 度: ≥98%分子式: C11H14O3性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 86-87℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 補(bǔ)充中藥理藥效: 抗氧化,美白亮膚鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

鳳仙萜四醇苷A英文名稱 Santalol分 子 量: 220.35CAS NO.: 11031-45-1純 度: ≥98%分子式: C15H24O性狀: 無色至微黃色稠厚液體規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 由檀香木油分餾得α和β的異構(gòu)體混合物。通常是甲、乙位的混合物,以樟腦為原料合成而得藥理藥效: 檀香醇具有抗菌、利尿的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:乙腈:0.1%冰醋酸水=55:45  λ:280nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng):

鳳仙萜四醇苷B英文名稱 Rutaecarpine分 子 量: 287.32CAS NO.: 84-26-4純 度: ≥98%分子式: C18H13N3O性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 259-260℃溶解性: 溶于乙醇、、石油醚、苯,幾乎不溶于水提取來源: 吳茱萸藥理藥效: 吳茱萸次堿具有鎮(zhèn)痛、降血壓及體溫上升、擴(kuò)張血管、保護(hù)心臟的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC-RP:正丁醇-0.6%正辛烷-1.0%甲酸-1.2%乙腈-88.2%水   λ:254nm (僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

鳳仙萜四醇苷C英文名稱 Schisandrin C分 子 量: 384.42CAS NO.: 61301-33-5純 度: ≥98%分子式: C22H24O6性狀: 無色晶體規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 122~123℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 五味子藥理藥效: 五味子丙素具有拮抗 、抗癌、抗?jié)?、保肝的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:甲醇:水(65:35)  λ:250nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

鳳仙萜四醇苷K英文名稱 Schisandrol B分 子 量: 416.46CAS NO.: 58546-54-6純 度: ≥98%分子式: C23H28O7性狀: 無色晶體規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 97~99℃溶解性: 可以、乙酸乙酯、DMSO等溶劑,不溶于水提取來源: 五味子藥理藥效: 五味子醇乙具有抗癌、抗病毒、保肝的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:甲醇-水梯度洗脫  λ:254nm(僅供參考)或:甲醇:水溶液=70:30 波長:250nm貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

佛手酚英文名稱 Vitamin K分 子 量: 450.7CAS NO.: 12001-79-5純 度: ≥98%分子式: C31H46O2性狀: 黃色至橙色透明黏稠液體,無臭規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 苜蓿藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng):
馬立克氏病病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書泊洛沙姆188有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in Water別名: 聚醚英文名稱: Polyethylene-polypropylene glycol188

k-卡拉膠有效期: 3年級(jí)別: BR溶解性: 10mg/mL in water別名: 卡拉膠類型III Κ-角叉菜聚糖 角叉萊膠

丹磺酰氯有效期: 3年溶解性: 20mg/ml CHCL3別名: 丹磺酰氯 1-二甲氨基萘-5-磺酰氯英文名稱: Dansyl Chloride

大黃素有效期: 2年溶解性: 5mg/ml  EtOH別名: 朱砂蓮甲素英文名稱: Emodin

辣椒紅有效期: 3年別名: 辣椒紅素英文名稱: CapsanthinCAS: 465-42-9

阿斯巴甜有效期: 3年溶解性: 80mg/mL Water 別名: L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯英文名稱: Aspartame

二水槲皮素有效期: 2年級(jí)別: 醫(yī)藥級(jí)溶解性: 10 mg/mL EtOH別名: 二水櫟精; 二水槲皮黃素; 櫟精二水合物

齊墩果酸別名: 土當(dāng)歸酸英文名稱: Oleanolic acidCAS: 508-02-1分子式: C30H48O3 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 馬立克氏病病毒 PCR檢測(cè)試劑盒 50T
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