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革蜱探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-27
點擊次數(shù):
806
產(chǎn)品特點:
革蜱探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次革蜱探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

革蜱探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Dermacenter spp.

貨號

 YSP96616

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
鳥嘌呤鹽酸鹽EHMT1 (E6Q8B) Rabbit mAb嘧啶甲酸

鳥嘌呤硫酸鹽SignalSilence® cdc2 siRNA I(S)-1-N-BOC-哌甲酸甲酯

腺嘌呤鹽酸鹽PDI (C81H6) Rabbit mAb嘧啶-2-羧酸

肌苷;次核苷PDI (C81H6) Rabbit mAb2-氟-甲酸

肌苷(標準品)Cortactin Antibody二并[b,f][1,4]硫氮雜卓-11-[10H]酮

5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)ATF-2 (D4L2X) XP® Rabbit mAb硝基鄰二甲

5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)ATF-2 (D4L2X) XP® Rabbit mAb2-氨基嘧啶-5-羧酸

5-溴-2’-脫氧尿苷(BRDU)Cortactin (H222) Antibody(氯甲基)甲酸

胞苷;胞嘧啶核苷TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb環(huán)己基異酸酯

胞嘧啶核苷,胞苷(標準品)TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb(3aR,4S,5R,6aS)-(-)-六氫-(羥甲基)-2-氧代-2H-環(huán)戊并[b]呋喃-5-基 1,1'-聯(lián)-甲酸酯

dATP,三酸脫氧腺苷鈉鹽AUP1 (D5M9Q) Rabbit mAb反式-(1R,2R)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽

dGTP;三酸脫氧鳥苷鈉鹽Asymmetric-Methyl-PABP1 (Arg455/Arg460) (C60A10) Rabbit mAb二甲氨基-1-

dCTP;三酸脫氧胞苷鈉鹽Phospho-NDRG1 (Ser330) Antibody硅烷偶聯(lián)劑 JH-M902

dTTP;2‘-脫氧胸苷-5’三酸鈉鹽(dTTP)Sav1 AntibodyL-氨

2‘-脫氧尿苷Brg1 (A52) Antibody2-氨基噻吩-甲酸乙酯

β-胸苷(dT);2'-脫氧胸苷Brg1 (A52) Antibody2-溴丁酸甲酯

2’-脫氧鳥苷;2'-dGPhospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb (Sepharose®Bead Conjuga)5,6-二氨基脲嘧啶

2‘-脫氧胞苷Phospho-Connexin 43 (Ser368) Antibody溴-2-三氟甲酸
革蜱探針法熒光PCR檢測試劑盒骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒SATB1  核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體20 ul

骨特異性性酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒Phospho-SATB1 (Ser47)  酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體100 ul

骨特性性酸酶C端肽ELISA試劑盒SCF  干細胞生長因子抗體100 ul

骨橋素(OPN)ELISA試劑盒SCG3/SgIII  分泌粒蛋白3抗體100 ul

骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒SCN1A  SCN1A抗體100 ul

骨鈣素(OT)ELISA試劑盒SCN2A  SCN2A抗體20 ul

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒SCN9A/NAV1.7  電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體500 ul

骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒SCP2/NLTP  固醇攜帶蛋白2抗體100 ul

骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒SCP3  聯(lián)會復(fù)合體蛋白3抗體100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 革蜱 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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