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偽中間型葡萄球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-12-03
點(diǎn)擊次數(shù):
900
產(chǎn)品特點(diǎn):
偽中間型葡萄球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
  50次偽中間型葡萄球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

樣品RNA的抽提:
產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質(zhì)量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

 產(chǎn)品名稱

偽中間型葡萄球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Staphylococcus pseudintermedius

 貨號(hào)

 YSP97215

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
胚胎植入前蛋白3(PREI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 云芝栓孔菌(變色栓菌) 10MG

松果腺蛋白(PNN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 山綠豆根瘤菌 25g

酸甲羥戊酸激酶(PMVK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 海陳文新氏菌 5g

叢狀蛋白A1(PLXNA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) >98.0%(GC) 葡萄座腔菌 1g

叢狀蛋白A2(PLXNA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) >98.0%(GC) 總狀毛霉 5g

叢狀蛋白A3(PLXNA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 大腸埃希菌 1g

叢狀蛋白A4(PLXNA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 根瘤菌 25g

叢狀蛋白B2(PLXNB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 鮑魚側(cè)耳 5g

叢狀蛋白B3(PLXNB3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98.0%(GC) 樹舌靈芝 5g

叢狀蛋白C1(PLXNC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 90% Magnivallibacter 100g

叢狀蛋白D1(PLXND1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 90% 大腸埃希氏菌 25g

絲束蛋白3(PLS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% Vibrio variabilis  100g

絲束蛋白1(PLS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 貝氏谷氨酸桿菌 25g

多效調(diào)節(jié)因子1(PLRG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 距園毛霉 5g

酸甘油酸脫氫酶(PHGDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 卷枝毛霉 25g

普列克底物蛋白2(PLEK2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 釀酒酵母 5g

普列克底物蛋白(PLEK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌 25g

酸組氨酸性酸酶1(PHPT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 發(fā)酵性酵母 5g
偽中間型葡萄球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體HA  透明質(zhì)酸300 ul

線粒體裂變1蛋白抗體LN  層粘連蛋白100 ul

叉頭蛋白P1抗體ChRM2(Human)  毒蕈型酰膽受體M2300 ul

鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體CINC(human)  中性粒細(xì)胞趨化因子()300 ul

纖維母細(xì)胞生長因子5抗體 Alpha-IFN-b (humen)  抗α干擾素受體300 ul

脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體Activin A  活化素 A100 ul

感覺神經(jīng)蛋白1抗體ALCAM  白細(xì)胞活化粘附因子100 ul

線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體cAMP  環(huán)-酸腺苷20 ul

FC段IgE受體α多肽抗體ANG  血管緊張素100 ul

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 偽中間型葡萄球菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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