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帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-16
點(diǎn)擊次數(shù):
739
產(chǎn)品特點(diǎn):
帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  50T帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

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產(chǎn)品名稱

帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Paranavirus(PARV)RTPCR

 貨號(hào)

 HE31349-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
彩虹245plus廣譜蛋白Marker(5-245KD)  20T(100ul) 別名 預(yù)染彩虹蛋白marker英文名稱 ColorMixed Protein Marker(5-245KD)儲(chǔ)存條件 -20℃,有效期2年單位 支產(chǎn)品特點(diǎn): l 三色預(yù)染,顏色鮮亮,條帶整齊,便于觀察。 l 穩(wěn)定性能突出,經(jīng)檢測4℃放置兩年無明顯降解。 l 用量少,節(jié)約成本,僅5ul即可完美呈現(xiàn)(1.5mm,10孔梳)?! 廣譜多帶,一支即可滿足多種實(shí)驗(yàn)需求?!‘a(chǎn)品簡介: 本產(chǎn)品包含13種彩色預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白,分子量范圍為5kD-245kD,每種蛋白含量約為0.2-0.4mg/ml。預(yù)染marker可以用于直接觀察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳或轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶,其中25kD為綠色條帶,75kD為紅色條帶,其余10條是藍(lán)色條帶?!?/span>

超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3-20.1kDa)  15T 英文名稱 Protein Marker(3.3kD-20.1kD)儲(chǔ)存條件 -20℃,有效期1年單位 支產(chǎn)品簡介: 本產(chǎn)品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成,分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5μg,配有一支1×上樣緩沖液。 凝膠制備及染色注意事項(xiàng): 1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí),30v跑1-2小時(shí)后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí),把電壓調(diào)至100v,至電泳結(jié)束,整個(gè)電泳過程大約需要6-8小時(shí)。 2. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會(huì)影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離?!?. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對(duì)于分子量小于10000的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì),推斷其是否落入預(yù)測的分子量范圍?!?. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時(shí)間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會(huì)消失?!?. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進(jìn)行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時(shí)間不允許,也可不進(jìn)行固定直接染色。如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性,請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300),該產(chǎn)品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點(diǎn),是常規(guī)染色液的替代品?!?/span>

1M DTT溶液/二硫蘇糖醇  1ml 別名 二硫蘇糖醇;1,4-二硫代-DL-蘇糖醇;1,4-二巰基-DL-蘇糖醇;1,4-二巰基-2,3-丁二醇;英文名稱 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol分子式 C4H10O2S2分子量 154.25儲(chǔ)存條件 -20℃,有效期1年單位 瓶DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,純度>99%。常用還原劑,有抗氧化作用,進(jìn)口分裝。DTT和巰基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時(shí),兩者效果相近,但DTT價(jià)格略高一些。是一種還原蛋白質(zhì)S-S鍵的試劑;生化研究用作巰基保護(hù)劑;酶的專一性抑制劑;測定酶活力?!?/span>

預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3kD-31.0kD)  20T 英文名稱 Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD)儲(chǔ)存條件 -20℃,有效期1年產(chǎn)品簡介 本產(chǎn)品包含預(yù)染的3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD??梢杂糜谥苯佑^察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。經(jīng)Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時(shí)以及轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍(lán)色的蛋白條帶。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種預(yù)染蛋白含量約為40μg,配有一支1×上樣緩沖液?!∈褂谜f明: 1. 開封后,溶于200 μ1 1×上樣緩沖液,可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝,每管10 μl,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復(fù)凍融?!?. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳?!?/span>

4×SDS-PAGE分離膠緩沖液(PH=8.8)  100ml 英文名稱 SDS-PAGE Separating Gel Buffer,4×(pH 8.8)儲(chǔ)存條件 RT,有效期1年本試劑是由Tris和SDS混合而成的,主要用于SDS-PAGE凝膠(變性聚丙烯酰胺凝膠)制備實(shí)驗(yàn)。配制分離膠時(shí),10ml制膠體系中加入2.5ml(4倍稀釋)。 組分                              濃度 Tris-HCl(pH=8.8)    1.5mol/L  SDS                              0.4%(W/V) 
帕臘南病毒PCR檢測試劑盒說明書磷化蛋白激酶AKT1抗體Dictamnine別名: 分子式: C12H9NO2性狀: Powder純度: 99.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

磷化蛋白激酶AKT1抗體Melatonin別名: 分子式: C13H16N2O2性狀: Powder純度: 99.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

磷化蛋白激酶AKT1抗體L-Carnitine別名: 分子式: C7H15NO3性狀: Powder純度: 99.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

乙醛脫氫酶2型抗體Glutathione別名: 分子式: C10H17N3O6S性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

γ-氨基丁醛脫氫酶抗體trahydropalmatine別名: (+)-trahydropalmatine; 右旋四氫巴馬汀分子式: C21H25NO4性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 止痛;鎮(zhèn)靜;催眠;紫堇屬;小檗堿;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

衰老相關(guān)蛋白5抗體Aglain B別名: 分子式: C36H42N2O8性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 米仔蘭屬;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體(-)-Corlumine別名: 分子式: C21H21NO6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: GABA拮抗劑;驚厥劑;紫堇屬;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫

釉基質(zhì)蛋白抗體Conquinamine別名: Epiquinamine分子式: C19H24N2O2性狀: Brown powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 金雞納屬;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 帕臘南病毒 PCR檢測試劑盒 50T
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