特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
2'-脫氧胸苷-5'-一酸二鈉鹽β-Amyloid (1-42 Specific) (D3E10) Rabbit mAb*基(2-基氧)硅烷

衛(wèi)茅(>99%，分子生物學(xué)級)DNAJC2/MPP11 (D6B1E) Rabbit mAb三（五氟代基）硅烷

2-氯乙基膦酸(>90%,植物激素級)SignalSilence® Puma siRNA I*硫基硅烷

硝酸鐵九水PAX9 (D9F1N) Rabbit mAb2，3，*基戊烷

松三糖DyLight™ 350 Phalloidin2，3，*基戊烷

聚乙二20000Rab11FIP1 (D9D8P) Rabbit mAb基二氯硅烷

對甲磺酸鈉PathScan® Total Androgen Receptor Sandwich ELISA Kit基(氯甲基)二甲基硅烷

高酸鈉一水(>97%,BR)β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb*基炔硅烷

SPDP；N-琥珀酰亞-(2-吡啶二硫代)酸酯BAF Complex Antibody Sampler Kit*基-2-炔氧基硅烷

2-氨基噻唑(>98%，BR)c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)基硫*基硅烷

氯化鈰七水MRP4/ABCC4 (D1Z3W) Rabbit mAb三基硅烷

D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)SMYD3 (D2Q4V) Rabbit mAb乙氧基-*基硅烷

D-阿拉伯糖Sin1 (D7G1A) Rabbit mAb*基疊氮化硅

三氯六氨絡(luò)鈷;六氨基氯化鈷Prostatic Acid Phosphatase (D3Y5P) Rabbit mAb*基硅烷化

米吐爾(>98%,BC)uPAR (D4Q5S) Rabbit mAb（*基硅烷）甲基氟代烷

鹽酸吡哆SimpleChIP® Human StAR Intron 1 Primers氨甲基*基硅烷

硅油Glycolysis II Antibody Sampler Kit1-甲基金剛烷

溴化鈉LGP2 (D3I3L) Rabbit mAb1-羥乙基金剛烷
牡蠣包拉米蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒Phospho-FAK (Tyr861)  酸化粘著斑激酶抗體500 ul

甲狀腺激素受體β(THRb)ELISA試劑盒Phospho-FAK (Tyr576/577)  酸化粘著斑激酶抗體100 ul

甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒Phospho-FAK (Tyr925)  酸化粘著斑激酶抗體100 ul

甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒Phospho-FAK (Tyr407)  酸化粘著斑激酶抗體100 ul

甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA試劑盒phospho-FAK (Tyr577)  酸化粘著斑激酶抗體100 ul

甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒FAF1  Fas相關(guān)1因子抗體100 ul

甲狀旁腺激素1受體(PTH1R)ELISA試劑盒phospho-FAK (Ser732)  酸化粘著斑激酶抗體100 ul

甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗體ELISA試劑盒FAK2/Pyk2  富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體20 ul

甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)ELISA試劑盒phospho-Pyk2 (Tyr402)  酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體500 ul