熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團，3'端標(biāo)記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品)RBPSUH (D10A4) XP® Rabbit mAb（甲磺?；┧?/span>

大豆苷,黃豆苷 （標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)乙酰基酸

大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)2-羧基酸

大黃素S6 Ribosomal Proin (54D2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-巰基并噻唑

大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)AIF (D39D2) XP® Rabbit mAb異辛酸

大黃素甲(標(biāo)準(zhǔn)品)AIF (D39D2) XP® Rabbit mAb戊二縮

大黃酸UVRAG Antibody2-溴-5-基吡啶

大黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)MDA-5 (D74E4) Rabbit mAbL-谷氨酸-5-甲酯

大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)MDA-5 (D74E4) Rabbit mAb氟-硝基溴芐

大薊苷GFAT1 (D12F4) Rabbit mAb鹽酸金剛乙

大麥芽(標(biāo)準(zhǔn)品）Dyskerin (D6N4K) Rabbit mAb基酸

丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品)eIF2α (D7D3) XP® Rabbit mAbΑ-氨基異丁 酸 甲基 酯 鹽酸鹽

丹參素eIF2α (D7D3) XP® Rabbit mAb基-2-炔-1-

丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)FastScan™ ELISA Microwell Strip Pla酸三乙酯

丹參酮I（標(biāo)準(zhǔn)品）Dicer (D5F2) Rabbit mAb2-氯-甲酸

丹參酮IMono-Methyl-Histone H3 (Lys4) (D1A9) XP® Rabbit mAb5-羥基-2-吡啶羧酸

丹參酮IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)Mono-Methyl-Histone H3 (Lys4) (D1A9) XP® Rabbit mAbN,N,N',N'-四甲基乙二

丹參酮IIACD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 647 Conjuga)對叔丁基磺酰氯
禽痘病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒ATP5E蛋白抗體CD24/FITC  熒光素標(biāo)記CD24蛋白抗體IgG100 ul

ATP5G2蛋白抗體CD25/IL-2RA/FITC  熒光素標(biāo)記CD25/白介素2-受體抗體IgG100 ul

ATP6V0D2蛋白抗體CD26/ADCP2/DPP IV /FITC  熒光素標(biāo)記CD26抗體IgG20 ul

ATP6V1B2蛋白抗體CD27/TNFRSF7/FITC  熒光素標(biāo)記CD27抗體IgG100 ul

ATPIF1蛋白抗體CD28/FITC  熒光素標(biāo)記CD28蛋白抗體IgG100 ul

Attractin蛋白抗體Ingrin Beta1/CD29(ingrin beta 1)/FITC  熒光素標(biāo)記整合素β1蛋白抗體IgG100 ul

酸化有絲分裂激酶B抗體CD30/TNFRSF8/FITC  熒光素標(biāo)記CD30抗體IgG20 ul

肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細胞黏附分子-1抗體IgG100 ul

ALKB蛋白抗體CD31(PECAM-1)/PE  熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細胞黏附分子-1抗體IgG100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。