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奧爾森派琴蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-12-01
點擊次數(shù):
925
產(chǎn)品特點:
奧爾森派琴蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次奧爾森派琴蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

奧爾森派琴蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Perkinsus olseni

貨號

 YSP97069

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
羧肽酶N1(CPN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 植物乳桿菌植物亞種 10g

蛋白酶體亞基β6(PSMβ6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 4-雄烯-11β-醇-3,17-二酮 大腸埃希菌 10mg

轉(zhuǎn)位因子蛋白(TSPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 4-雄烯-11β-醇-3,17-二酮 假單胞菌 50mg

金屬硫蛋白3(MT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 松樹噬幾丁質(zhì)菌 5g

安定結(jié)合抑制因子(DBI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 糞腸球菌 1g

嗜鉻蛋白B(CHGB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 球孢白僵菌 1g

肝再生擴展生長因子(GFER)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 炭黑曲霉 25g

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跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 100g

半胱氨酸甘氨酸豐富蛋白1(CSRP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 蕁麻青霉 25g

二甲基精氨酸二水解酶1(DDAH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 豬鏈球菌 500g

輔酶Q10同源物B(COQ10B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 蘇云金芽胞桿菌 1g

Jagged 1蛋白(JAG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 葡萄座腔菌 5g

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成纖維細胞生長因子13(FGF13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 白酒  酸酯、己酸酯 100g

10kDa熱休克蛋白1(HSP10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 土地桿菌 25g

組蛋白H4(H4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 1.00mg/ml 阿氏埃希氏菌 1ml

利鈉肽受體1(NPR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 35 μg/mL 異辛烷溶液 溶血葡萄球菌 1ml
奧爾森派琴蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒軸突相關(guān)粘附分子抗體ACEI (Angionsin I Converting Enzyme Inhibitor )  血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑(抗原)300 ul

6型膠原蛋白α5抗體Acinus peptide  ACINUS 多肽抗原100µl

神經(jīng)細胞粘附分子CALL抗體ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23)  促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)300 ul

中性粒細胞殺菌蛋白BP30抗體Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta)  肌動蛋白(抗原)300 ul

21號染色體開放閱讀框56抗體AEBP1 (Adipocy enhance binding proin 1)  脂肪細胞增強結(jié)合蛋白1100 ul

T淋巴細胞CD1抗體MMP-9(matrix metalloproinase 9)  基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)100 ul

細胞角蛋白5抗體AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor)  晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原)300 ul

補體C9a抗體14-3-3 proin  14-3-3 蛋白(多肽抗原)300 ul

20號染色體開放閱讀框141抗體14-3-3 family proin(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris))  植物14-3-3蛋白抗原300 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 奧爾森派琴蟲 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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