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 首頁>>產(chǎn)品展示>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>>艾利希體屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

艾利希體屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-15
點擊次數(shù):
886
產(chǎn)品特點:
艾利希體屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次艾利希體屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

艾利希體屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Ehrlichiae spp.

貨號

 YSP96645

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
阿莫西林鈉Hemoglobin γ (D4K7X) Rabbit mAb基富馬酸

CBZ-D-纈氨酸FoxO3a (75D8) Rabbit mAb (Biotinylad)L-beta-高脯氨酸鹽酸鹽

Z-Arg(Mtr)-OH·CHAPhospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)6-溴藜蘆

CBZ-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽PathScan® Total Tyro3 Sandwich ELISA Kit檸檬

N-CBZ-D-氨酸Phospho-SHIP1 (Tyr1020) Antibody(溴基)二甲基

BOC-L-氨酸DUSP6/MKP3 Antibody對肼

BOC-L-氨酸Abi1 (D3G6C) Rabbit mAb戊酸乙酯

BOC-甘氨酸Neogenin (D7M8E) Rabbit mAb2-氨基噻唑-甲酸乙酯

BOC-L-異亮氨酸Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)2,6-二氯異煙酸

BOC-L-脯氨酸Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb (Biotinylad)對甲砜基甲

BOC-L-色氨酸HDAC3 (7G6C5) Mouse mAb氯-1H-吡唑并[3,d]嘧啶

BOC-L-天冬氨酸HDAC3 (7G6C5) Mouse mAb三氟磺酸鋅

BOC-L-谷氨酸SOCS1 (A156) Antibody1,二氟

BOC-L-亮氨酸SOCS1 (A156) Antibody酚

N-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸MST2 Antibody1-氯烷

BOC-L-絲氨酸MST2 Antibody氨基乙炔

BOC-L-纈氨酸HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)2-氨基-5-氯-硝基吡啶

BOC-L-天冬酰Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) (41G9) Rabbit mAb (Biotinylad)二酸二叔丁酯
艾利希體屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒Tie1  血管生成素受體1抗體300 ul

β-轉(zhuǎn)導重復相容蛋白(β-TrCP)ELISA試劑盒Thy-1/CD90  CD90抗體100 ul

β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒CD93/C1qrp  CD93抗體20 ul

β細胞素(BTC)ELISA試劑盒CD94/KLRD1  NK細胞表面抑制性受體CD94抗體100 ul

β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒CD97  CD97抗體100 ul

β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒CD99/E2 antigen  CD99抗體100 ul

β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒Thymosin Alpha-1  胸腺肽α1抗體300 ul

β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒T4  甲狀腺素T4抗體100 ul

β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒Tie2  血管生成素受體2抗體20 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 艾利希體屬通用 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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