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彭氏變形菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-27
點(diǎn)擊次數(shù):
881
產(chǎn)品特點(diǎn):
彭氏變形菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次彭氏變形菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

彭氏變形菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Proteus penneri

貨號

 YSP97105

熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) AR,98% 畫眉草彎孢 5g

L1-細(xì)胞粘附分子(L1CAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 殼菌 1g

天冬酰胺合成酶(ASNS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 枯草芽胞桿菌 250mg

白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制因子(LEI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 紫紅曲霉 5g

蛋白酪氨酸酸酶受體G(PTPRG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% pBlueScript SK(+) 25ml

興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(EAAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 馬賽菌屬 5ml

驅(qū)動蛋白家族成員5A(KIF5A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 狹霉素鏈霉菌 100g

驅(qū)動蛋白家族成員18A(KIF18A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 冷溫木拉克酵母 25g

G蛋白偶聯(lián)雌激素受體1(GPER)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 松口蘑 100g

Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞白血病序列1(MCL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 大豆慢生根瘤菌 25g

IgG-Fc片段結(jié)合蛋白(FcγBP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 腸球菌屬 500g

序列相似家族132成員A(FAM132A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 泡盛曲霉 25g

形成素結(jié)合蛋白1(FNBP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 泡菜大洋芽胞桿菌 5g

肌脂蛋白(SLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 假單胞菌 250mg

D-多巴色素變位酶(DDT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 秀珍菇 1g

歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 黑曲霉 250mg

鈣網(wǎng)蛋白(CRT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)  氣微菌 1g

鈣腔蛋白(CALU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 枯草芽孢桿菌 25g
彭氏變形菌探針法熒光PCR檢測試劑盒松果體N甲基酰羥色抗體CASP4(Caspase-4)  半胱酸蛋白酶蛋白-4抗原1 ml

短鏈脫氫還原酶1抗體Trk B  神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)5 ml

DNAJC7蛋白抗體Trk B  神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)1 Kit

動力結(jié)合蛋白DNMBP抗體Trk C  神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)1 ml

白喉酰生物合成樣蛋白2抗體TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT)  促甲狀腺素受體(抗原)100 ul

Notch信號通路Delta樣配體3抗體Caspase-8 (pro Mch5)  半胱氨酸蛋白酶8抗原1 ml

動力蛋白激活蛋白2抗體TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT)  促甲狀腺素受體(抗原)5 ml

視神經(jīng)細(xì)胞相關(guān)蛋白/早老素結(jié)合蛋白抗體TY3H ( Tyrosine Hydroxylase )  酪氨酸羥化酶(抗原)1 ml

DHX螺旋酶抗體Tubulin-Alpha  微管蛋白(抗原)1 Kit

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 彭氏變形菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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