PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
冰凍切片組織RHO 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒　FAM116B ELISA Kit　100 ul

石蠟切片組織RHO 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒　FAM164C ELISA Kit　100 ul

載玻片細胞RHO 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒　EYA4 ELISA Kit　100 ul

冰凍切片組織RHO 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒　EYA3 ELISA Kit　100 ul

石蠟切片組織RHO 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒　EZH1 ELISA Kit　100 ul

細胞RHO 蛋白表達比色法定量檢測試劑盒　EXOSC2 ELISA Kit　100 ul

細胞RHO 蛋白表達熒光定量檢測試劑盒　F4/80 ELISA Kit　20 ul

RHO 蛋白表達西方雜交分析試劑盒　EYA1 ELISA Kit　100 ul

RHO 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒　EYA3 ELISA Kit　100 ul

RHO 蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒　EYA2 ELISA Kit　20 ul

細胞TRAIL 蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒　EYA4 ELISA Kit　100 ul

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載玻片細胞CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒　FAM111B ELISA Kit　100 ul

冰凍切片組織CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒　EYA1 ELISA Kit　100 ul

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胎兒滴蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機制相關(guān)蛋白1抗體CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit  細胞角蛋白18100 ul

神經(jīng)細胞膜糖蛋白M6aCgA(Human Chromogranin) ELISA Kit  嗜鉻蛋白A1 Kit

G蛋白偶聯(lián)受體101抗體pRB(Human retinoblastoma tumor suppressor proin) ELISA Kit  視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白100 ul

胰高血糖素樣肽-1受體/GLP-1受體抗體MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit  成熟促進因子1 Kit

糖脂酰肌抗體ASGPR(Human asialoglyco proin receptor) ELISA Kit  去唾液酸糖蛋白受體1 Kit

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甘酸-N-?；D(zhuǎn)移酶樣1抗體AFP-L2(Human alpha-fetoproin Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit  小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2100 ul