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隱孢子蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-27
點擊次數(shù):
845
產(chǎn)品特點:
隱孢子蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次隱孢子蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

PCR技術的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

產(chǎn)品名稱

隱孢子蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Cryptosporidium spp.

貨號

 YSP96601

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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點:
成本高;
設計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
1,6-二氨基己烷-N,N,N',N'-四乙酸(>98.0%(T))PathScan® Total YAP Sandwich ELISA Kit5-氟-

二乙基三基五乙酸二酐(>98.0%(T))PHD-2/Egln1 Antibody2-氟-甲基吡啶

乙二四乙酸二氫二二水合物(>98.0%(T))PTMScan® Basophilic Kinase Substra Motif [(R/X)(R/X)Xp(S/T)] Kit2-氟-5-甲基吡啶

乙二-N,N'-二乙酸基-N,N'-二酸水合物(>98.0%(T))IRE1α (14C10) Rabbit mAb環(huán)基溴化鎂

N,N,N',N'-乙二四(亞甲基膦酸)水合物(>98.0%(T))IRE1α (14C10) Rabbit mAb氨基吡唑并[3,d]嘧啶

乙二四乙酸二酐(>98.0%(T))Inflammasome Antibody Sampler Kit羥基吲哚

增甘(>97.0%(T))PIP5K1C AntibodyNα-CBZ-Nε-BOC-D-賴氨酸

N-(2-羥乙基)乙二-N,N'N'-三乙酸三鈉二水合物(>98.0%(T))Annexin A1 Antibody氨基-溴吡啶

N-(2-羥乙基)乙二-N,N',N'-三乙酸(>98.0%(T))Phospho-Cyclin D1 (Thr286) (D29B3) XP® Rabbit mAb2,二氟溴芐

N-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))Phospho-Cyclin D1 (Thr286) (D29B3) XP® Rabbit mAb間溴甲

次氮基三乙酸二鈉鹽(>99.0%(T))GCN2 Antibody2-氨基-芐氧基吡啶

N-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))HSPA4/Apg-2 Antibody四甲基哌啶

次氮基三(亞甲基膦酸)(約50%的水溶液,約2.2mol/L)GCN5L2 (C26A10) Rabbit mAb2-氯噻吩-5-甲酸

次氮基三(亞甲基膦酸)(約50%的水溶液,約2.2mol/L)[螯合劑]GCN5L2 (C26A10) Rabbit mAb甲基-甲酸甲酯

1,二-N,N,N',N'-四乙酸(>98.0%(T))G9a/EHMT2 (C6H3) Rabbit mAb2-溴-甲氧基吡啶

三乙四-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))G9a/EHMT2 (C6H3) Rabbit mAb乙鎂

TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))SimpleChIP® Human PAI-1 Promor PrimersL-谷氨酸-5-叔丁基酯

二甲偶氮紫II(>95.0%(HPLC))VRK1 (1F6) Mouse mAbBoc-L-谷氨酸
隱孢子蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒抗環(huán)胍氨酸肽抗體(Anti-CCP-antibody)ELISA試劑盒PRDX3  過氧化還原酶3抗體100 ul

抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒RRM1  核糖核苷酸還原酶1抗體20 ul

抗弓形蟲IgM抗體ELISA試劑盒PRL  泌素抗體100 ul

抗弓形蟲IgG抗體ELISA試劑盒PRL1/PTP4A1  肝再生酸酯酶1抗體20 ul

抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒PRL2/PTP4A2  肝再生酸酯酶2抗體300 ul

抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒PRL3/PTP4A3  酸酯酶3蛋白抗體100 ul

抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒prox-1  prox-1抗體300 ul

抗IVIgG抗體ELISA試劑盒PH-4/P4H-TM  脯氨酸水解酶4抗體100 ul

抗IgE受體抗體ELISA試劑盒PHD3  脯氨酸羥化酶抗體100 ul

產(chǎn)品相關關鍵字: 隱孢子蟲通用 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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