PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
堿性唾液脯氨酸豐富蛋白2(PRB2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%(GC)　希瓦氏菌屬　250mg

堿性唾液脯氨酸豐富蛋白1(PRB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　青春雙歧桿菌　1g

Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　烏芝　1g

Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　茄鏈格孢　5g

天冬氨酸β羥化酶(ASPH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　哈里法克斯希瓦氏菌　1g

分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　剛果嗜皮菌　250mg

序列相似家族3成員B(FAM3B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　赭色擲孢酵母　25g

含膠原三螺旋重復(fù)蛋白1(CTHRC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黃蜜環(huán)菌　5g

AE結(jié)合蛋白1(AEBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　馬葡萄球菌　1g

微管蛋白β1(TUBβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　農(nóng)藥速測(cè)卡　5g

酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　大腸埃希氏桿菌　25g

花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　大腸埃希氏菌　5g

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子6(CEACAM6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　桿狀毛霉　1g

線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　雜色曲霉　5g

F-框亮氨酸豐富重復(fù)蛋白3(FBXL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　馬克斯克魯維酵母　100mg

脂肪酸合酶(FASN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　75%　鞘氨醇盒菌屬　100g

金屬硫蛋白1M(MT1M)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　75%　產(chǎn)氣腸桿菌　25g

Vasorin蛋白(VASN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　75%　假單胞菌屬　5g
雜色青霉探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體Leupeptin   亮抑酶肽300 ul

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體GRP( Gastrin Releasing Peptide )  促胃泌素釋放肽（抗原）300 ul

大腦亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體BSA(標(biāo)準(zhǔn))  牛血清白蛋白（標(biāo)準(zhǔn)）300 ul

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體MBP (Myelin Basic Proin, Rat)peptide  髓鞘性蛋白(多肽）300 ul

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體MOG35-55 (myelin oligo-dendrocy glycoproin-MOG)  髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(抗原)100 ul

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5抗體IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I )  胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（抗原）100 ul

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體VIP (Vasoactive Instinal peptide)  血管活性腸肽20 ul

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II )  胰島素樣生長(zhǎng)因子-II（抗原）300 ul

細(xì)胞周期通道和神經(jīng)細(xì)胞分化蛋白1抗體TP-5(Thymopentin)  胸腺五肽100 ul